Khi làm việc tại Phòng thí nghiệm Lederle,[11] Koprowski chế tạo ra vắc xin bại liệt đầu tiên trên thế giới, dựa trên một chủng virus bại liệt sống giảm độc lực. Vắc xin này sử dụng bằng đường uống. Trong quá trình nghiên cứu một loại vắc-xin bại liệt có tiềm năng, ông tập trung vào virus sống giảm độc lực hơn là virus bất hoạt.

Koprowski phát triển vắc-xin bại liệt của mình bằng cách làm suy giảm độc lực virus trong tế bào não của một con chuột thuộc loài Sigmodon hispidus, một loài rất nhạy cảm với bệnh bại liệt.[11] Ông đã tiêm vắc-xin cho mình vào tháng 1 năm 1948 và cho 20 trẻ em tại Làng Letchworth, quận Rockland, New York vào ngày 27 tháng 2 năm 1950. 17 trong số 20 trẻ đã có kháng thể chống lại virus bại liệt - 3 trẻ còn lại có sẵn kháng thể - và không trẻ nào gặp phải các biến chứng. Trong vòng 10 năm, vắc-xin của ông đã được sử dụng ở bốn lục địa.